347 Хемијски састав од нерђајућег челика Величина венске или капиларне крви, специфичне за САРС-ЦоВ-2, одговор Т-ћелија одређује имунитет на ЦОВИД-19.

Хвала вам што сте посетили Натуре.цом.Користите верзију претраживача са ограниченом подршком за ЦСС.За најбоље искуство препоручујемо да користите ажурирани прегледач (или онемогућите режим компатибилности у Интернет Екплорер-у).Поред тога, да бисмо обезбедили сталну подршку, приказујемо сајт без стилова и ЈаваСцрипт-а.
Клизачи који приказују три чланка по слајду.Користите дугмад назад и следећи да бисте се кретали кроз слајдове или дугмад контролора слајдова на крају да бисте се кретали кроз сваки слајд.

347 нерђајући челик хемијски састав

Хемијски састав цеви од нерђајућег челика 347

Хемијски састав и механичка својства цеви намотаја од нерђајућег челика 347 су следећи:
- Угљеник – 0,030% мак
- хром – 17-19%
- Никл – 8-10,5%
- Манган – 1% мак

Механичка својства цеви од нерђајућег челика 347

Према произвођачу цеви од нерђајућег челика 347, механичке особине 347 спиралне цеви:
- Затезна чврстоћа (пси) – 75.000 мин
- Снага течења (пси) – 30.000 мин
- Издужење (% у 2″) – 25% мин
- Тврдоћа по Бринелу (БХН) – 170 мак

Примене и употреба цеви од нерђајућег челика 347

• Цев од нерђајућег челика 347 која се користи у млиновима шећера.
• Цев од нерђајућег челика 347 која се користи у ђубриву.
• Цев од нерђајућег челика 347 која се користи у индустрији.
• Цев од нерђајућег челика 347 која се користи у електранама.
• Цев од нерђајућег челика 347 која се користи у храни и млечним производима.
• Цев од нерђајућег челика 347 која се користи у фабрици нафте и гаса.
• Произвођач завојних цеви од нерђајућег челика 347 који се користи у бродоградњи.

Сматра се да Т ћелије специфичне за САРС-ЦоВ-2 штите од инфекције и прогресије ЦОВИД-19, али нема директних доказа за то.Овде смо упоредили мерења целе крви САРС-ЦоВ-2-специфичних Т ћелија позитивних на интерферон-γ са позитивним резултатима дијагностичког теста ЦОВИД-19 (ПЦР и/или бочни ток) у року од 6 месеци од Лианове узимања крви.Међу 148 учесника који су донирали узорке венске крви, величина одговора Т ћелија специфичног за САРС-ЦоВ-2 била је значајно већа код оних који су остали заштићени него код оних који су били заражени (П <0,0001).% ризика од инфекције, док је висок интензитет смањио овај ризик на 5,4%.Ови резултати су генерализовани на додатних 299 учесника који су тестирали скалабилни тест капиларне крви који би могао да олакша приступ подацима о имунитету Т-ћелија на нивоу популације (14,9% наспрам 4,4%).Према томе, мерење Т ћелија специфичних за САРС-ЦоВ-2 може предвидети ризик од инфекције и треба га проценити приликом праћења имунолошког статуса појединца и популације.
Мерење и разумевање имунолошког одговора на инфекцију САРС-ЦоВ-2 важно је за развој ефикасних будућих стратегија за смањење јавног здравља и економских утицаја будућих епидемија ЦОВИД-19.Идентификација имунолошких корелација ће пружити важне информације о подложности популације вирусној инфекцији, могуће рано упозорење о врхунцу хоспитализације, а такође ће омогућити људима да лично управљају ризиком од инфекције и ризиком од заразе других.Показало се да је имунолошки надзор критичан за процену ефикасности вакцина против ЦОВИД-19 код здравих и високоризичних пацијената1,2,3, посебно код мутаната САРС-ЦоВ-24, а откривање имунокомпромитованог значиће потребу за јачањем имунитета Вакцинишите се и спречите будућих избијања .
Ниво имунитета појединца на инфекцију САРС-ЦоВ-2 зависи од више фактора: вирусног оптерећења у време излагања, варијанти вируса, старости, претходне вакцинације/статуса инфекције, коморбидитета, лекова и што је најважније, анти-САРС-ЦоВ инфекције .2 адаптивни имуни одговор се јавља у тренутку излагања вирусу5.Процена имуног одговора на САРС-ЦоВ-2 инфекцију и/или вакцинацију фокусирала се на серолошке тестове који мере присуство антитела специфичних за структурни протеин (нпр. шик гликопротеин).Међутим, само присуство или одсуство антитела не одређује тачно заштитни имуни одговор, пошто су одговори значајно ослабљени током времена6 и неутрализација САРС-ЦоВ-2 варијанти код особа које се опорављају или двоструко вакцинисане Слабе активности, што може довести до велике број продорних инфекција7.Заиста, заштита од симптоматског ЦОВИД-19 изазваног варијантом Омицрон (Б.1.1.529) је ослабила на око 10% након само 4-6 месеци вакцинације мРНА, иако је заштита од тешке болести трајала >68% најмање 7 месеци8.Мерење одговора Т ћелија адаптивног памћења, који пружају дугорочну заштиту од вирусне инфекције, најбољи је показатељ осетљивости на инфекцију САРС-ЦоВ-2, а самим тим и бољи показатељ ризика од позитивног тестирања на ЦОВИД-199, пошто специфични Т ћелије могу спречити инфекцију.без сероконверзије10,11.Међутим, мерењу одговора Т ћелија је посвећена мање пажње због методолошких потешкоћа и логистичких проблема у добијању и транспорту узорака венске крви, посебно када се спроводе велике опсервационе студије за процену ефикасности вакцине и праћење имунитета.Међутим, вакцинисане особе показују снажну активност Т ћелија против варијанти САРС-ЦоВ-2, потенцијално надокнађујући губитак реактивности антитела како би се ограничила тежина ЦОВИД-1912,13.
Овде смо покушали да разумемо да ли једно мерење одговора Т ћелија САРС-ЦоВ-2 може предвидети апсолутни ризик од инфекције САРС-ЦоВ-2 у року од 6 месеци од узимања узорка крви, без обзира на претходне факторе утицаја на имунитет.Да бисмо тест Т ћелија учинили високом пропусношћу и примењивим на веће студије, такође смо покушали да тест учинимо минијатуризованим тако да се може извести помоћу капиларног узорка крви из прста.
Измерили смо ћелијске и хуморалне имуне одговоре код здравих донатора користећи комбиновану детекцију САРС-ЦоВ-2 Т ћелија и ИгГ антитела на основу целе венске крви (за карактеристике учесника, видети март 2022. 14. Код вакцинисаних давалаца, САРС-ЦоВ-2- специфични Т-ћелијски одговори су одређени мерењем нивоа интерферона-γ (ИФН-γ) у плазми након стимулације пуне крви САРС-ЦоВ-2 пептидом (као раније, референце 14,15,16,17,18) и повезаних ИгГ одговора са нуклеокапсидом (Н) били су повећани код оних који су пријавили претходну инфекцију, иако су оба одговора била већа код претходно инфицираних невакцинисаних донора, максимална у телу (Слика 1а,б). ИгГ одговори против шиљастих гликопротеина (РБД, С1, С2) били највећи код претходно заражених вакцинисаних донатора (Слика 1ц–е).
САРС-ЦоВ-2-специфични ИФН-γ+ Т ћелијски одговори су мерени тестом венске пуне крви и на основу вакцинација учесника и претходног статуса инфекције САРС-ЦоВ-2 (потврђеног ПЦР-ом и/или тестом бочног протока)' Вац + /Инф +' н = 60 (зелено), 'Вац + /Инф-' н = 82 (плаво), 'Вац-/Инф +' н = 4 (жуто), 'Вац-/Инф-' н = 1 (не примењује).САРС-ЦоВ-2-специфичне реакције везивања ИгГ циља нуклеокапсид („Н“) (б; ****П < 0,0001, **П = 0,0016), шиљасти домен за везивање рецептора („РБД“) (ц; ** П = 0,0022, *П < 0,015), шик подјединица 1 („С1“) (д; ***П = 0,0005, *(Вац + /Инф+ вс. Вац + /Инф-) П = 0,022, *(Вац- /Инф+ вс. Вац+/Инф-) П = 0,012) и вршна подјединица 2 („С2“) (е) је измерена тестовима венске пуне крви и на основу вакцинације учесника и претходног САРС-ЦоВ-2 (потврђеног ПЦР-ом и/ или тест бочног тока) инфективни статус.'Вац + /Инф +' н = 60 (зелено), 'Вац + /Инф-' н = 71-82 (плаво), 'Вац-/Инф +' н = 4 (жуто).Поређења су направљена коришћењем Крускал-Волисовог теста, прилагођеног за вишеструка поређења коришћењем Дун теста.Подаци се приказују као графикони (средња линија на медијани, горња граница на 75. перцентилу, доња граница на 25. перцентилу) са брковима на минималним и максималним вредностима.Свака тачка представља донатора.Необрађени подаци се пружају у облику датотека необрађених података.
Након узимања узорка крви, од учесника је затражено да сами пријаве позитивне резултате ПЦР-а и/или теста бочног протока на ЦОВИД-19;ако су учесници били позитивни између 1. септембра 2021. и 29. децембра 2021., претпостављало се да су заражени вирусом Делта (Б.1.617.2) варијанте коронавируса и Омикроном (Б.1.1.529) у јавном здравству Велса након 29. децембра 2021. године, када ова опција забринутости постаје доминантна.Међу 148 процењивих давалаца, приметили смо стопу инфекције од 26,3% (39/148) у року од 6 месеци од давања крви, од којих је 38 примило другу или трећу дозу вакцине против ЦОВИД-19 (пробој инфекције се десио након Пфизер/БиоНТецх ( БНТ162б2) мРНА вакцина или АстраЗенеца вакцина (ЦхАдОк1 нЦоВ-19));заражен је и невакцинисани донор.Величина САРС-ЦоВ-2-специфичних ИФН-γ-позитивних Т ћелија била је значајно мања код оних који су пријавили позитиван дијагностички тест на ЦОВИД-19 него код неинфицираних давалаца (П <0,0001; слика 2а), углавном због оптимална индукција одговора Т ћелија вакцинацијом код неких учесника (П = 0,050; Додатна слика 1).Није било корелације између величине одговора ИФН-γ+ Т ћелија и времена до позитивног резултата теста на ЦОВИД-19 (додатна слика 2).Насупрот томе, ни РБД-, С1-, С2-везујући ИгГ одговори (Слике 2б–д) нити РБД-, С1-неутралишући одговори антитела нису били специфични за дивљи тип или делта САРС-ЦоВ-2 (Б.1.617).) (Допунска слика 3) може разликовати људе под ризиком од инфекције.Међутим, ниски Н-везани ИгГ одговори против САРС-ЦоВ-2 корелирали су са ризиком од инфекције ЦОВИД-19 (П = 0,0084; Слика 2е);они који су били позитивни били су 85% мање вероватни (П = 0,00035; ОР 0,15, 95).% ЦИ: 0,047–0,39 (додатна слика 4).
Узорци венске крви здравих давалаца (н = 148) проценили су САРС-ЦоВ-2-специфичне ИФН-γ+ Т-ћелијске одговоре (а; ****П < 0,0001) и везивање Спике рецептора за специфични САРС-ЦоВ -2 стимулус.домен („РБД“) (б), подјединица шиљка 1 („С1″) (ц), подјединица шиљка 2 („С2″) (д) и нуклеокапсид („Н“) (е; **П = 0,0084 ) .Идентификовани учесници који су били позитивни на ЦОВИД-19 (ПЦР и/или бочни ток);све инфекције су се десиле у року од 6 месеци од узимања узорка крви.Поређења су направљена коришћењем двостраног Манн-Вхитнеи теста.Подаци се приказују као графикони (средња линија на медијани, горња граница на 75. перцентилу, доња граница на 25. перцентилу) са брковима на минималним и максималним вредностима.Свака тачка представља донатора.нс није важно.Топлотна мапа ф приказује Спеарманове ранг корелације између варијабли за наведени скуп података.Поређења која нису била статистички значајна су искључена из матрице и означена празним ћелијама.Необрађени подаци се пружају у облику датотека необрађених података.
Претходно постављена дијагностичка позитивна граница од 14 сматрана је превише произвољом да би се проценио ризик од поновне инфекције, па су успостављени интерквартилни распони да би се установили апсолутни параметри ризика.Статистички модел, који је укључивао само варијабле које су имале значајан утицај на резултате, показао је да је величина САРС-ЦоВ-2-специфичног одговора ИФН-γ+ Т ћелија најважнији имунолошки биомаркер за одређивање шанси појединца да буде тестиран на ЦОВИД.-19 позитивних (слика 2ф и допунска слика 4).Пацијенти са САРС-ЦоВ-2 специфичним ИФН-γ+ Т ћелијским одговором у трећем (194-489 пг/мл ИФН-γ) и четвртом (>489 пг/мл ИФН-γ) квартилу 65% (П = 0,055; ОР 0,35, 95% ЦИ: 0,11–1,00) и 90% (П = 0,0050; ОР 0,098, 95% ЦИ: 0,014–0,42) имало је више учесника.Шансе су мале (допунска слика 4).Све у свему, учесници са САРС-ЦоВ-2 специфичним Т ћелијским одговором из венске крви ≤79 пг/мЛ ИФН-γ имали су 43,2% ризик од продора инфекције након 6 месеци, у поређењу са одговором >489 пг/мЛ.мл ИФН-γ је имао ризик од инфекције од 5,4% (табела 2).
Тестирање венске пуне крви је ограничено по обиму због потребе да флеботомиста узме узорак.Да би се повећала доступност тестирања Т ћелија и ИгГ за САРС-ЦоВ-2, развијена је алтернативна метода узорковања капиларне крви која омогућава учесницима да добију узорке крви из прстију код куће.Колико нам је познато, није било претходних извештаја о мерењу антиген-специфичне функције Т ћелија у узорцима капиларне крви.Раније је показана јака корелација између броја лимфоцита добијених коришћењем упоредивих узорака капиларне и венске крви.Поред тога, објављено је да тестови засновани на пуној крви за мерење одговора Т ћелија специфичних за САРС-ЦоВ-2 користе само 320 μЛ венске крви,20 чиме се елиминише забринутост у вези са учесталошћу прогениторних Т ћелија у узорцима капиларне крви.
Користили смо овај стандардизовани колаборативни тест високе пропусности САРС-ЦоВ-2 Т ћелија и ИгГ антитела на бази капиларне пуне крви да бисмо измерили ћелијски и хуморални имуни одговор код учесника са различитим коморбидитетима и претходним статусом вакцинације/инфекције (Табела 1).регрутовани из целе Уједињеног Краљевства између 24. јануара и 14. марта 2022.14. Већина (90,9%) узорака прстију је исправно добијена и послата у лабораторију у року од 24 сата од узимања.У неким случајевима, узорци су примљени у року од 48 сати од вађења крви, али ниједан од ових узорака није прошао контролу квалитета и није утицао на укупна мерења Т ћелија или антитела (додатна слика 5).Иако су постојале разлике у величини САРС-ЦоВ-2-специфичног ИФН-γ+ Т ћелијског одговора мереног у одговарајућим узорцима капиларне и венске крви код неких појединаца, није било значајних разлика у целини (П = 0,88; Додатна слика 6 ).).
САРС-ЦоВ-2-специфични ИФН-γ+ Т ћелијски одговори су значајно повећани код вакцинисаних појединаца који су такође пријавили претходну инфекцију (П = 0,0001), али не значајно већи него код претходно инфицираних невакцинисаних донора (П = 0,19, Сл. 3а).).Одговори ИгГ против спике гликопротеина (РБД, С1, С2) били су значајно већи код вакцинисаних донора него код невакцинисаних, без обзира на претходни статус инфекције (Слика 3б-д).Занимљиво је да је средњи Н-везани ИгГ одговор био највећи код претходно инфицираних невакцинисаних учесника у поређењу са вакцинисаним учесницима, иако то није достигло значај (Слика 3е).Међу невакцинисаним и неинфицираним донаторима који су се самопрогласили, 15 од 37 (40,5%) учесника било је позитивно на Н-везани ИгГ, изнад претходно утврђеног прага од 2,0 БАУ/мЛ14;ових 15 учесника Дванаест од ових пацијената је било позитивно на ИФН-γ+ Т ћелијски одговор изнад претходно утврђеног прага од 22,7 пг/мЛ ИФН-γ14.Стога је вероватно да су ови учесници раније били заражени САРС-ЦоВ-2 и да нису тестирани на ЦОВИД-19 због личног избора, недостатка опреме за ПЦР и/или бочни проток, или су били асимптоматски.Иако је постојала значајна корелација између одговора Т ћелија на нивое ИФН-γ+ и Н-везаног ИгГ код невакцинисаних донатора (П = 0,0044; додатна слика, Н-везани ИгГ одговор се смањио брже од Н-везаног ИгГ одговора, док је ИФН-γ Одговори + Т ћелија су одржавани без обзира на статус вакцинације, иако је број донора 50 недеља након изазивања био низак (додатна слика 8). Тип вакцинације се генерално мало разликовао у уоченим ИгГ одговорима специфичним за САРС-ЦоВ-2, Т ћелије и РБД-повезане, иако су учесници који су примили две дозе БНТ162б2 праћене ревакцинацијом мРНА1273 показали значајно више нивое ИФН-γ + Т ћелија осетљивије на САРС-ЦоВ-2 од оних који су примили две дозе ЦхАдОк1 и БНТ162б2 (додатни Слика 9) Поред тога, пријављени коморбидитети су имали малу укупну разлику у уоченим одговорима Т ћелија у поређењу са здравим донаторима (допунска слика 10).
САРС-ЦоВ-2-специфични ИФН-γ+ Т ћелијски одговори мерени су тестом капилара пуне крви и засновани су на вакцинацији учесника и претходном инфективном статусу САРС-ЦоВ-2 (потврђен ПЦР-ом и/или тестом бочног протока).'Вац + /Инф +' н = 42 (зелено), 'Вац + /Инф-' н = 158 (плаво), 'Вац-/Инф +' н = 33 (жуто), 'Вац- /Инф-' н = 37 (сива).****П < 0,0001, ***П = 0,0001, *(Вац+/Инф- вс. Вац-/Инф-) П = 0,045, *(Вац-/Инф+ вс. Вац- /Инф-) П = 0,014 .САРС-ЦоВ-2 специфичне реакције везивања ИгГ на домен везивања рецептора шиљака („РБД“) (б; ****П < 0,0001, нс: није значајно), шиљаста подјединица 1 („С1“) (ц; * * **П < 0,0001, нс: није значајно), шик подјединица 2 („С2″) (д; ****П < 0,0001, ***П = 0,0005, *П = 0,016) и нуклеокапсид (“Н”) (е; ****П < 0,0001, нс није значајно) мерене су анализом венске пуне крви и на основу вакцинација учесника и претходног САРС-ЦоВ-2 (потврђеног ПЦР-ом и/или анализом бочног тока) Инфекције су подељене на статус.'Вац + /Инф +' н = 46 (зелено), 'Вац + /Инф-' н = 182 (плаво), 'Вац-/Инф +' н = 34 (жуто), 'Вац-/Инф-' н = 37 (сива).Поређења су направљена коришћењем Крускал-Волисовог теста, прилагођеног за вишеструка поређења коришћењем Дун теста.Подаци се приказују као графикони (средња линија на медијани, горња граница на 75. перцентилу, доња граница на 25. перцентилу) са брковима на минималним и максималним вредностима.Свака тачка представља донатора.Необрађени подаци се пружају у облику датотека необрађених података.
Као и раније, од учесника је затражено да пријаве позитивне резултате ПЦР-а и/или бочног крвотока за ЦОВИД-19;према здравственој агенцији Уједињеног Краљевства, претпостављало се да су учесници били заражени вирусом Омицрон (Б.1.1.529) у време тестирања позитивне варијанте вируса, пошто је то била доминантна варијанта у УК током периода студије.Међу 299 процењивих давалаца, приметили смо стопу инфекције од 8,0% (24/299) у року од три месеца од капиларне донације, од којих седам није вакцинисано.Удео коморбидитета међу свим учесницима био је мањи код оних који су били позитивни на ЦОВИД-19 (10,7%) у односу на оне који су били негативни на ЦОВИД-19 (24,4%, табела 1), што може бити последица чињенице да су учесници са одређеним болести су опрезнији и штите од потенцијалних последица као што су дијабетес и рак.Као што је примећено у кохорти венске крви, САРС-ЦоВ-2-специфичне интерферон-γ (ИФН-γ)-позитивне Т ћелије мерене у узорцима капиларне крви појединаца који су пријавили позитиван дијагностички тест на ЦОВИД-19.Величина одговора била је значајно нижа него код неинфицираних донора (П = 0,034; Слика 4а) због релативно лоше индукције Т ћелијског одговора вакцинацијом и/или претходном инфекцијом (додатна слика 11).Слично, ни РБД-, С1-, С2-везујући ИгГ одговори (Слике 4б–д) нити РБД-, С1-неутралишући одговори антитела нису били специфични за дивљи тип или делта САРС-ЦоВ-2 (Б. 1.617).(Допунска слика 12).Могу се идентификовати појединци са било којим значајним ризиком од инфекције.За разлику од венске кохорте, Н-повезани ИгГ одговори такође не разликују ризик од ЦОВИД-19 (Слика 4е), што сугерише да Омицрон варијанта (Б.1.1.529) повећава имунолошку евазију код претходно заражених особа, као што је недавно описано 21. Насупрот томе, снага САРС-ЦоВ-2-специфичног ИФН-γ Т ћелијског одговора је поново била најважнија варијабла у одређивању индивидуалних изгледа позитивног тестирања на ЦОВИД-19 (Слика 4ф).Све у свему, учесници са САРС-ЦоВ-2-специфичним капиларним Т-ћелијским одговором ≤23,7 пг/мЛ ИФН-γ имали су 14,9% ризик од инфекције након три месеца у поређењу са одговором >141,6 пг/мЛ.мл ИФН.-γ је имао ризик од инфекције од 4,4% (Табела 2).
Одговори ИФН-γ+ Т ћелија специфични за САРС-ЦоВ-2 (а; *П = 0,034) и САРС-ЦоВ-2 специфични ИгГ-циљани рецептор-везујући домен („РБД“) (б), подјединица 1 (' С1′) (ц), шиљаста подјединица 2 ('С2') (д) и реакција везивања нуклеокапсида ('Н') (е).Учесници идентификовани као позитивни на тестове на ЦОВИД-19 (ПЦР и/или тест бочног крвотока), све инфекције су се десиле у року од 3 месеца од узимања узорка крви.Поређења су направљена коришћењем двостраног Манн-Вхитнеи теста.Подаци се приказују као графикони (средња линија на медијани, горња граница на 75. перцентилу, доња граница на 25. перцентилу) са брковима на минималним и максималним вредностима.Свака тачка представља донатора.нс није важно.Топлотна мапа ф приказује Спеарманове ранг корелације између варијабли за наведени скуп података.Поређења која нису била статистички значајна су искључена из матрице и означена празним ћелијама.Необрађени подаци се пружају у облику датотека необрађених података.
Како прелазимо у следећу фазу пандемије ЦОВИД-19, фокус ће се померити са превенције на индивидуално управљање ризиком и идентификовање рањивих чланова друштва.Успостављање корелата имунитета на ЦОВИД-19 је кључно за ефикасно идентификовање и лечење ових група високог ризика.Сада је све више доказа да имунитет Т-ћелија штити од инфекције САРС-ЦоВ-2 и ограничава тежину ЦОВИД-1910.Овде представљени подаци показују да комбинована снага САРС-ЦоВ-2-специфичних ИФН-γ+ Т ћелија одговора на структурне протеине шиљака, мембране и нуклеокапсида пружа већу заштиту од ЦОВИД-19 него везивање антитела.19 промовише или неутралише одговоре .и треба га узети у обзир приликом процене индивидуалног и/или имунитета стада.РНК вируси као што су САРС-ЦоВ-2 или вирус грипа А (ИАВ) избегавају серолошку неутрализацију брзо развијајући изложене епитопе Б-ћелија на површинским антигенима које препознају антитела.Заштитни имуни одговор који пружају Т ћелије може одражавати циљање епитопа из више очуваних региона вирусних протеина који не могу брзо да избегну имуни одговор.Заштита посредована Т ћелијама од нових варијанти САРС-ЦоВ-2 слична је хетеросубтипској заштити посредованој Т ћелија циљањем конзервираних интринзичних протеина уочених у подтиповима ИАВ22,23.
Упркос огромном потенцијалу за мерење ћелијског имунолошког одговора на ЦОВИД-19, релативно мало пажње је посвећено развоју тачних, високо пропусних, стандардизованих тестова Т-ћелија.Традиционалне сложености и трошкови повезани са мерењем одговора Т ћелија онемогућавају тачно одређивање имунитета Т ћелија приликом скрининга на имунитет велике популације.Иако је недавно постало доступно неколико комерцијалних тестова стимулације пептида из целе крви, свима је тренутно потребан флеботомиста да би добили крв, ограничавајући доступност и обим.Системи капиларне крви се широко користе за одређивање преваленције антитела на САРС-ЦоВ-2 у популацији.Прилагодили смо тестове капиларне крви да бисмо извршили тестове стимулације пептида из целе крви да бисмо проценили реактивност Т ћелија на структурне протеине САРС-ЦоВ-2 и специфичне одговоре антитела САРС-ЦоВ-2.У ствари, комбиновано мерење САРС-ЦоВ-2-специфичних антитела и Т ћелија у истом узорку капиларне крви је веома атрактивно: (и) смањује потребу за вишеструким тестовима крви по учеснику, (ии) побољшава искуство и разумевање учесника;(иии) побољшати логистику и смањити дуплирање, (ив) смањити утицај на животну средину јер је потребно мање лабораторијског потрошног материјала и испоруке узорака.Иако је укупна реактивност ИФН-γ била слична између одговарајућих узорака венске и капиларне крви, примећено је да је нижа у кохорти капиларне крви учесника (слика 4а) у поређењу са кохортом венске крви (слика 2а).Вредности ИФН-γ Постоји неколико објашњења за овај налаз, наиме, велики број учесника са коморбидитетима који захтевају имуносупресивну терапију је регрутован у кохорту за узорковање капиларне крви (Табела 1) и Виабилност и/или функцију Т ћелија добијених из васкуларних узорци могу бити ниски, посебно узимајући у обзир услове дуготрајног складиштења узорака пре пептидне стимулације.
Тренутно широко доступна вакцина против ЦОВИД-19 пружа најбољу заштиту од тешке болести за већину прималаца у року од 6 месеци од вакцинације8.Охрабрујуће, упркос лошој серолошкој неутрализацији САРС-ЦоВ-26,7 варијанти изазваној вакцином, одговори Т-ћелија изазвани вакцинацијом против дивљег типа САРС-ЦоВ-2 остали су високо реактивни, пошто се појавило 25 других.Подаци које овде представљамо показују важност шире процене имуногености вакцине, истичући вакцине са недовољним имунитетом Т-ћелија да би се спречила изненадна инфекција и упорни пренос вируса.Такође смо приметили да су многе невакцинисане особе регрутоване у капиларну кохорту имале значајан одговор САРС-ЦоВ-2-специфичних Т ћелија (и Н-везујућих ИгГ) без обзира на претходну вакцинацију, што је вероватно због претходне инфекције.Уместо да вакцинишу одговарајуће појединце, њихов ризик од инфекције треба проценити на основу њиховог тренутног статуса имунизације и донетих избора.
Ограничења ове студије укључују уверење да су учесници сами пријавили инфекцију САРС-ЦоВ-2 након узимања крви како би утврдили релевантност имунитета;неки учесници могу имати асимптоматску инфекцију и не могу да се подвргну ПЦР и/или тестирању бочног тока на ЦОВИД-19.У нашем скупу података такође су недостајале информације о лековима учесника у време узимања узорака крви.Поред тога, с обзиром на то да су сви наши учесници пријавили само благе/умерене симптоме или никакве симптоме, није било могуће идентификовати имуне одговоре из нашег скупа података који су предвиђали повећан ризик од тешке болести и хоспитализације због ЦОВИД-19.Међутим, присуство одговора ЦД8+ Т ћелија против епитопа специфичних за нуклеокапсид недавно је повезано са заштитом од тешког ЦОВИД-1926.Поред тога, овде коришћени тест није мерио одговоре Т ћелија на специфичне рано експримиране неструктурне протеине САРС-ЦоВ-2 за које се недавно показало да се првенствено акумулирају код серонегативних здравствених радника који су били у контакту са зараженим пацијентима.На основу овог рада, с обзиром на преваленцију преношења у заједници у време регрутовања и велику вероватноћу контактне инфекције у популацији, чини се да је број Т ћелија специфичних за САРС-ЦоВ-2 пронађен у нашим тестовима такође способан да се очисти.субклиничке инфекције у нашим кохортама.Коначно, нисмо мерили производњу интерлеукина 2 од стране Т ћелија јер је наш претходни рад показао лошу идентификацију одговора Т-ћелија специфичних за САРС-ЦоВ-214, иако ИЛ-2-специфични одговори могу указивати на већ постојећу унакрсну реактивност.ћелије повезане са одбраном од инфекције САРС-ЦоВ-211.
Узети заједно, ови подаци наглашавају основну потребу за дугорочним лонгитудиналним студијама које укључују САРС-ЦоВ-2 специфичне одговоре Т ћелија у мере имунитета на нивоу популације.Ови напори могу бити потпомогнути развојем новог теста капиларне крви који мери одговор Т-ћелија.
Истраживачки пројекат је регрутовао учеснике од фебруара 2021. до марта 2022. Кохорта здравих давалаца (н = 148) који су дали узорке венске крви састојала се првенствено од универзитетског особља и студената који учествују у служби за скрининг ЦОВИД-19 Универзитета у Кардифу или особља у основној школи у Цардифф.Сви учесници су иначе били здрави и нису пријавили да су узимали било какве имуносупресивне лекове (погледајте табелу 1 за карактеристике).Кохорта учесника који су донирали узорке капиларне крви укључивала је све добровољне даваоце (старости од 18 година) из целе Велике Британије.У периоду од 24. јануара до 14. марта 2022. године, у студију су укључена 342 учесника, од којих је 299 предало узорке крви у лабораторију.Многи учесници су остали невакцинисани и/или су пријавили озбиљне коморбидитете, укључујући аутоимуне болести и рак (погледајте табелу 1 за карактеристике).Ова студија је добила етичко одобрење од Одбора за етику истраживања Невцастле и Нортх Тинесиде 2 (ИД ИРАС: 294246) и Одбора за етику истраживања Медицинског факултета Универзитета у Кардифу (СРЕЦ реф: СМРЕЦ 21/01).Сви учесници су дали писмени информисани пристанак пре укључивања.Учесници нису добили никакву надокнаду за учешће у овој студији.
Узорци венске крви су добијени венепункцијом у 6 или 10 мл литијум или натријум хепарин вакутаинер (БД).Узорци капиларне крви су добијени ланцетом за прст, а затим сакупљени у микроконтејнере за хепарин (БД).Потребно је најмање 400 µл крви;сваки узорак мањи од ове количине биће одбијен.Други разлози за одбацивање узорка укључивали су масивну коагулацију и/или хемолизу и неуспех прикупљања вискозне плазме за анализу (додатна слика 5).Укупно 299 узорака капиларне крви било је доступно за процену одговора антитела, од којих је 270 узорака било доступно и за процену одговора Т ћелија.
САРС-ЦоВ-2 специфични одговори Т ћелија су процењени коришћењем имуно-Т теста ЦОВИД-19 (ИммуноСерв Лтд) и изведени као што је претходно описано14.Укратко, један венски вакутаинер од 6 мл или 10 мл натријум хепарина (БД) узет је од сваког учесника и обрађен у лабораторији у року од 12 сати од узимања крви.Иако је већина узорака обрађена у року од 24 сата, једна капиларна крв од 400–600 μл хепаринизоване микрокрварење (БД) сакупљена је у року од 48 сати од узорковања прстима.Узорци венске и/или капиларне крви стимулисани су одвојеним скуповима пептида специфичних за САРС-ЦоВ-2 (варијанта дивљег типа) као што је претходно описано14.Ова библиотека пептида садржи 420 15-мер секвенци са 11 преклапајућих аминокиселина које обухватају цео протеин шиљака (С1 и С2) (С; НЦБИ протеин: КХД43416 1), нуклеокапсидни фосфопротеин (НП; НЦБИ протеин: КХД43423 гМликопротеин мембране) НЦБИ протеин: КХД43419 1) кодирајуће секвенце (који се називају „С-/НП-/М-комбинаторна библиотека пептида”).Сви пептиди су пречишћени до >70%, растворени у стерилној води и коришћени у коначној концентрацији од 0,5 μг/мл по пептиду.Узорци су инкубирани на 37°Ц током 20-24 сата.Епрувете су затим центрифугиране на 5000 × г током 3 минута и ~150 µл плазме је сакупљено са врха сваког узорка крви.Чувајте узорке плазме на -20°Ц до месец дана пре покретања тестова за детекцију цитокина/антитела.
ИФН-γ је мерен коришћењем ИФН-γ ЕЛИСА МАКС Делуке сета (БиоЛегенд, каталошки број 430116) и изведен је према упутствима произвођача.Одмах након додавања стоп раствора (2Н Х2СО4), микроплоча је очитана на 450 нм коришћењем БиоЛегенд Мини ЕЛИСА читача плоча.ИФН-γ је квантификован екстраполацијом стандардне криве коришћењем ГрапхПад Присм.Вредности испод доње границе детекције теста су забележене као 7,8 пг/мл, вредности изнад горње границе детекције теста су забележене као 1000 пг/мл.
Анти-САРС-ЦоВ-2 РБД/С1/С2/Н ИгГ антитела су мерена коришћењем Био-Плек Про Хуман ИгГ САРС-ЦоВ-2 4-плек панела (Био-Рад, кат. бр. 12014634) и обележена према упутства произвођача.упутства .Узорци са вредностима изнад границе квантификације поново су анализирани у разблажењу 1:1000.Просечан интензитет флуоресценције куглица је мерен на Био-Плек 200 инструменту (Био-Рад).Концентрације антитела су израчунате помоћу ВИРОТРОЛ САРС-ЦоВ-2 једноструког контролног теста (Био-Рад) и конвертоване у СЗО/НИБСЦ 20/136 међународне референтне стандардне јединице (БАУ/мЛ) коришћењем фактора калибрације произвођача.
РБД и С1 подјединица-специфична неутрализујућа антитела против САРС-ЦоВ-2 дивљег типа и делта (Б.1.617) САРС-ЦоВ-2 линија мерена су коришћењем Био-Плек Про Хуман САРС-ЦоВ-2 Вариант Неутрализатион Антибоди Кит (Био -Рад, каталошки број 12016897), према упутствима произвођача.Измерите просечни интензитет флуоресценције на Био-Плек 200 (Био-Рад) и израчунајте проценат инхибиције (тј. неутрализације) користећи следећу формулу:
Тестови инфективне неутрализације за САРС-ЦоВ-2 су изведени као што је претходно описано28.Укратко, 600 ПФУ дивљег типа САРС-ЦоВ-2 је инкубирано са троструким серијским разблажењима плазме у дупликату током 1 сата на 37°Ц.Смеша је затим додата ВероЕ6 ћелијама током 48 сати.Монослојеви су фиксирани са 4% параформалдехида, пермеабилизовани са 0,5% НП-40 и инкубирани 1 сат у пуферу за блокирање (ПБС који садржи 0,1% твина и 3% обраног млека).Примарно антитело (анти-нуклеокапсид 1Ц7, Стратецх) је додато у пуфер за блокирање током 1 сата на собној температури.После испирања, секундарно антитело (анти-мишји ИгГ-ХРП, Пиерце) је додато у пуфер за блокирање током 1 сата.Једнослојеви су испрани, развијени коришћењем Сигмафаст ОПД и очитани на Цлариостар Омега читачу плоча.У сваки експеримент укључени су бунари без вируса, без вируса али без антитела и нормализовани серуми који показују међуактивност.
Статистичка анализа је извршена у ГрапхПад Присм (верзија 9.4.1).Нормалност скупа података је тестирана коришћењем Схапиро-Вилк теста.За сва поређења коришћени су непараметарски критеријуми.Манн-Вхитнеи тест је коришћен за неупарене узорке.Сви тестови су били двострани са номиналним прагом значајности П ≤ 0,05.
Иницијална истраживачка анализа скупа података је урађена у Р (верзија 4.0.3).Ово укључује развој Спеарманове униваријантне матрице корелације ранга, где је корелација између две варијабле представљена величином и бојом квадрата.Статистичка значајност између асоцијација израчуната је коришћењем Спеармановог рхо, где су вредности ≤0,05 сматране значајним.Поређења која нису била статистички значајна су искључена из матрице и означена празним ћелијама.П-вредности су прилагођене за вишеструка поређења коришћењем Холмове корекције.Модел бинарне логистичке регресије је коришћен за симулацију утицаја варијабли у скупу података на позитиван одговор на ЦОВИД-19.Одговори ИФН-γ Т ћелија и резултати титра анти-РБД/С1/С2/Н ИгГ су претворени у факторе, где је сваки појединац додељен одговарајућем квартилу за сваки резултат.Након тога је развијен почетни модел истраживања коришћењем глм функције у статистичком пакету (В4.0.3).Односи шансе изведени из овог оригиналног модела су извучени из коефицијената модела коришћењем функције 'оддс_плот' у пакету ОддсПлотти (В1.0.2).Када смо развијали модел унакрсне валидације, користили смо функцију „бестглм“ из пакета бестглм (В0.37.3) да бисмо ограничили пристрасност корисника и осигурали да се може изабрати најбољи подскуп предиктора.Одабрана метода је била „исцрпна“, а критеријум информација коришћен за процену уклапања модела био је АИЦ.Исти ток рада описан горе је коришћен за добијање односа шансе.
За више информација о дизајну студије, погледајте сажетак студије природе повезан са овим чланком.
Писма и захтеве за материјале треба упутити др Мартину Скару или професору Ендру Годкину.Овај чланак даје оригиналне податке.
Р код који се користи за креирање статистичких модела је јавно доступан без захтева29.Информације о поновном штампању и лиценце могу се наћи на ввв.натуре.цом/репринтс.
Мунро, АПС ет ал.Безбедност и имуногеност седам вакцина против ЦОВИД-19 као треће дозе (појачивача) после две дозе ЦхАдОк1 нЦов-19 или БНТ162б2 (ЦОВ-БООСТ) у УК: фаза 2, заслепљено, мултицентрично, рандомизовано, контролисано испитивање.Ланцет 398, 2258–2276 (2021).
Стеварт, АСВ ет ал.Имуногеност, безбедност и реактогеност хетерологне примарне вакцинације против ЦОВИД-19 (Цом-ЦОВ2) коришћењем мРНК, вирусних вектора и протеинских адјувантних вакцина у Уједињеном Краљевству: фаза 2, једнослепо, рандомизовано испитивање, тест неинфериорности.Ланцет 399, 36–49 (2022).
Лее, АРИБ ет ал.Ефикасност вакцина против ЦОВИД-19 код имунокомпромитованих пацијената: систематски преглед и мета-анализа.БМЈ 376, е068632 (2022).
Дејнираттисаи, В. ет ал.Смањена неутрализација САРС-ЦоВ-2 микронске варијанте Б.1.1.529 серумом након имунизације.Ланцет 399, 234–236 (2022).
Липсицх М, Краммер Ф, Регев-Иохаи Г, Лустиг И и Балисер РД Пробојна инфекција код особа вакцинисаних против САРС-ЦоВ-2: мерење, узроци и последице.Национални свештеник имунологије.хттпс://дои.орг/10.1038/с41577-021-00662-4 (2021).
Левин, ЕГ ет ал.Ослабљен имуни хуморални одговор на вакцину БНТ162б2 Цовид-19 током 6 месеци.Н. енг.Ј. Медицине.385, е84 (2021).
Царрено, ЈМ ет ал.Активност реконвалесцентних и вакциналних серума против САРС-ЦоВ-2 Омикрона.Природа 602, 682–688 (2022).
Цхемаителли, Х. ет ал.Трајање заштите катарске мРНА вакцине против САРС-ЦоВ-2 Омицрон БА.1 и БА.2 подваријанти.медркив хттпс://дои.орг/10.1101/2022.03.13.22272308 (2022).
Таи, МЗ ет ал.Учесталост Б ћелија меморије се смањује са продорном инфекцијом делта вакцине ЦОВИД-19.Молекуларна медицина ЕМБО.14, е15227 (2022).
Кунду, Р. ет ал.Унакрсно реактивне меморијске Т ћелије повезане су са заштитом контаката са ЦОВИД-19 од инфекције САРС-ЦоВ-2.Национална комуна.13, 80 (2022).
Геуртсван Кессел, ЦХ ет ал.Изразити САРС ЦоВ-2 омикрон-реактивни одговори Т ћелија и Б ћелија код прималаца вакцине против ЦОВИД-19.Наука.Имунологија.хттпс://дои.орг/10.1126/сцииммунол.або2202 (2022).
Гао, Иу ет ал.Наслеђене Т ћелије специфичне за САРС-ЦоВ-2 унакрсно препознају Омицрон варијанте.Национална медицина.28, 472–476 (2022).
Сцарр, МЈ ет ал.Мерење САРС-ЦоВ-2-специфичних Т ћелија из пуне крви открива асимптоматску инфекцију и имуногеност вакцине код здравих особа и пацијената са карциномом чврстог органа Имунологија хттпс://дои.орг/10.1111/имм.13433 (2021).
Тан, АТ ет ал.Брзо мерење САРС-ЦоВ-2 шик Т ћелија у пуној крви вакцинисаних и природно заражених особа.Ј. Цлиницал.инвестирати.хттпс://дои.орг/10.1172/ЈЦИ152379 (2021).
Таллантире, ЕУ ет ал.Одговор на вакцину против ЦОВИД-19 код пацијената са мултиплом склерозом.инсталирај.Неурони.91, 89–100 (2022).
Брадлеи РЕ ет ал.Перзистентна инфекција ЦОВИД-19 са Вискотт-Алдрицх синдромом нестала је након терапијске вакцинације: приказ случаја.Ј. Цлиницал.Имунологија.42, 32–35 (2022).